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Use of Posttranscription Gene Silencing in Squash to Induce Resistance against the Egyptian Isolate of the Squash Leaf Curl VirusUso del silenciamiento génico postranscripcional en la calabaza para inducir resistencia contra el aislado egipcio del virus del rizado de la hoja de la calabaza

Resumen

El virus del rizado de la hoja de calabaza (SqLCV) es un begomovirus bipartito que afecta a las plantas de calabaza. Se transmite por la mosca blanca Bemisia tabaci biotipo B causando severo rizado de la hoja, bandas en las venas, y la muda que termina con el retraso del crecimiento. En este estudio se ha aislado el clon genómico completo del SqLCV egipcio y se ha inducido el silenciamiento génico postranscripcional (PTGS) para desarrollar resistencia al virus. El SqLCV de Noubaria tiene más de un 95% de homología con los aislados de Jordania, Israel, Líbano, Palestina y El Cairo. Se introdujeron dos fragmentos de genes del SqLCV en sentido y antisentido utilizando el vector pFGC5049 para expresarlos como ARN en horquilla. El primer fragmento era de 348 pb del gen de la proteína asociada a la replicación (Rep). El segundo fragmento era de 879 pb y representaba la secuencia completa del gen de la proteína de movimiento (BC1). Utilizando PCR en tiempo real, se ha registrado un registro de silenciamiento del 97% para el constructo Rep/TrAP; como resultado, ha impedido la aparición de síntomas virales en la mayoría de las plantas ensayadas hasta dos meses después de la infección, mientras que el constructo que contiene el gen BC1 obtuvo una reducción en la acumulación de la expresión del genoma viral, tal y como aparece en los resultados de PCR en tiempo real, de 4,6 veces, lo que da un silenciamiento del 79%, que tuvo un efecto positivo en el desarrollo de síntomas en la mayoría de las plantas ensayadas.

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