Identification of Staphylococcal enterotoxin B sequences important for binding to a glycosphingolipid receptor imparting renal cell death and T lymphocyte proliferation

Identificación de secuencias de enterotoxina B estafilocócicas importantes para la unión a un receptor de glucosfingolípidos que imparten muerte de células renales y proliferación de linfocitos T

La enterotoxina estafilocócica B (SEB) es una enterotoxina producida por S. aureus. Este superantígeno se sabe que se alberga en el riñón en animales de experimentación y posteriormente entra en el intestino para causar diarrea, y shock tóxico. En este estudio hemos utilizado la SEB y una serie de péptidos sintéticos de SEB para evaluar su unión a los supuestos receptores en células tubulares proximales humanas cultivadas e impartir fenotipos.

En primer lugar, utilizando el análisis GC-MS de los azúcares de trimetilsililo del receptor glicoesfingólido de la SEB, identificamos este compuesto como digalactosilceramida en las células tubulares proximales del riñón humano. A continuación, observamos que el péptido SEB 191-220 estaba unido a estas células con la mayor afinidad, y esto fue notablemente inhalado por la presencia de digalactosilceramida y por el uso de la endoglicoceramidasa que puede separar específicamente el glúcido del receptor análogo. También hemos desarrollado un ensayo basado en ELISA para diagnosticar la presencia de SEB en los fluidos y alimentos humanos. Tras la unión del péptido SEB se utilizó el péptido 130- 160 (que contiene una secuencia altamente conservada KKKVTAQEL) para inhibir la proliferación celular mediante la inducción de la apoptosis por la vía de la esfingomielinasa neutra de la ceramida. En contraste, el péptido 130-160 fue el más efectivo para inhibir la proliferación inducida por la SEB en los linfocitos T humanos. Por lo tanto, los residuos que rodean al KKKVTAQEL pueden ser críticos en la proliferación de células T inducida por la SEB y podrían ser útiles para neutralizar el suero a la SEB. La importancia de este estudio es que la SEB recluta un glicoesfingolípido para unirse a las células del riñón y por lo tanto proporciona un nuevo objetivo para mitigar los efectos tóxicos de esta toxina.