Tempol decreases the levels of reactive oxygen species in human neutrophils and impairs their response to Mycobacterium tuberculosis

Tempol disminuye los niveles de especies reactivas de oxígeno en neutrófilos humanos y debilita la respuesta hacia Mycobacterium tuberculosis

Antecedentes y objetivos: Mycobacterium tuberculosis (Mtb), el principal agente causal de la tuberculosis humana (TB), sigue siendo un grave problema de salud pública. La respuesta inmunitaria innata tras la infección por Mtb desempeña un papel crucial en la prevención de la aparición de la TB activa y en la limitación de su propagación. Dado que las especies reactivas de oxígeno/nitrógeno (ROS/RNS) derivadas de los fagocitos durante el estallido oxidativo pueden combatir Mtb, planteamos la hipótesis de que el uso de antioxidantes podría aumentar la susceptibilidad del huésped a Mtb/TB. De ese modo, investigamos los efectos del nitróxido Tempol, un antioxidante con actividad similar a la superóxido dismutasa, sobre la respuesta de los neutrófilos frente a Mtb. Métodos: Se aislaron neutrófilos derivados de sangre humana de voluntarios sanos y se incubaron con Mtb (H37Ra) a diferentes multiplicidades de infección (MOI), en ausencia o presencia de Tempol. Los niveles de ROS en los neutrófilos se evaluaron mediante el ensayo de reducción del citocromo C (O2 extracelular) y el ensayo de quimioluminiscencia amplificada con luminol (ROS intracelular y extracelular total) y isoluminol (ROS extracelular). El ensayo de destrucción (protocolo de dos pasos) comprobó la capacidad micobactericida de los neutrófilos, calculando las tasas de fagocitosis (Kp) y de destrucción intracelular (Kk). Resultados: Los niveles de ROS y la capacidad de destrucción de los neutrófilos estimulados con Mtb disminuyeron significativamente con 450 µM de Tempol (p < 0,05). Curiosamente, Tempol disminuyó el kk de los neutrófilos, pero no afectó a su kp, lo que demuestra que una disminución putativa de los niveles de ROS, en última instancia, afectó a la matanza intracelular de Mtb. Conclusiones: Este estudio aporta ideas sobre el papel de los antioxidantes en la respuesta de los neutrófilos frente al Mtb, por lo que nuestros hallazgos merecen ser tenidos en cuenta de cara a futuros estudios e implicaciones clínicas.

1. INTRODUCCIÓN​

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) es el principal agente causante de la tuberculosis (TB) humana, una enfermedad que sigue siendo un grave problema de salud pública, principalmente en los países de ingresos bajos y medios, y causa altas tasas de mortalidad en todo el mundo. Se estima que alrededor de una cuarta parte de la población mundial está infectada de forma latente con Mtb, ya que las micobacterias residuales pueden entrar en una etapa latente; de ​​modo que aproximadamente el 10% de estos individuos corren el riesgo de desarrollar la enfermedad de tuberculosis a través de una reactivación posterior. en la vida, al menos en parte, debido a un posible trastorno de inmunodeficiencia [1-3]. En 2018, con 10 millones de casos nuevos y aproximadamente 1,2 millones de muertes a nivel mundial, la tuberculosis siguió siendo una de las 12 enfermedades más mortales del mundo; y, antes de la actual pandemia provocada por el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus-2 (SARS-CoV-2), esta enfermedad era la principal causa de muerte por un solo agente infeccioso.