Estandarización de un modelo basado en monocapas de células Caco-2 con aplicación en estudios de absorción de fármacos

Standardization of a model based on caco-2 cell monolayers with application on in vitro drug absorption tests

La biodisponibilidad de los fármacos administrados oralmente depende de su absorción y de su metabolismo. Entre los factores que determinan la absorción de un compuesto se encuentran la permeabilidad y las características de su transporte a través de la mucosa intestinal. La entidad encargada de la administración de alimentos y drogas norteamericana ( Food and Drug Administration / FDA) reconoce que la determinación in vitro de la permeabilidad usando modelos basados en monocapas de células Caco-2 puede ayudar a predecir la absorción in vivo de un fármaco. A pesar de su utilidad, en Colombia no se ha reportado la utilización de este modelo en los análisis de clasificación biofarmacéutica y de predicción de la biodisponibilidad oral. El objetivo de este trabajo fue estandarizar un modelo para el estudio de absorción basado en células Caco-2. Los coeficientes unidireccionales de permeabilidad aparente (Papp) de ranitidina y teofilina fueron establecidos en monocapas celulares en dirección apical-basolateral. Las muestras provenientes de la cámara basolateral fueron analizadas mediante cromatografía líquida de alta eficiencia y los valores de Papp calculados con las concentraciones halladas. Los coeficientes de variación intra e interdías encontrados permitieron establecer la precisión del sistema estandarizado. Con los valores de Papp obtenidos, se hizo la asignación de los compuestos a la clase de permeabilidad que concuerda con la reportada para cada uno. Para que el modelo sea utilizado en la determinación de permeabilidad de compuestos de interés, es necesaria su validación con moléculas de referencia

INTRODUCCIÓN

El desarrollo de moléculas candidatas a fármacos requiere la realización de estudios predictivos de su absorción oral con el fin de evidenciar los problemas de biodisponibilidad que se pueden presentar cuando son administrados por vía oral (1, 2). La permeabilidad de los fármacos a través de la membrana intestinal es el factor más importante en el momento de su clasificación biofarmacéutica, debido a que directamente se relaciona con el proceso de absorción oral (3-5). Se han desarrollado diferentes métodos experimentales para determinar la permeabilidad intestinal de los fármacos (in vivo, in situ e in vitro) con el objetivo fundamental de predecir absorción y definir el mecanismo involucrado en dicho proceso (1, 6 7). El fin de estas pruebas es establecer el Coeficiente de Permeabilidad (P) de un fármaco con base en un modelo matemático que relaciona el proceso de permeabilidad con el paso a través de la superficie intestinal (1, 8). El coeficiente de permeabilidad calculado in vitro a partir de medir en una cámara receptora la concentración de un compuesto, que ha pasado de una cámara dadora a través de monocapas celulares, se denomina coeficiente de permeabilidad aparente (Papp) (8-10).