Implementación de estrategias in vitro para evaluar la funcionalidad de un suero fetal bovino colombiano

Implementation of in vitro strategies to evaluate the functionality of a Colombian fetal bovine serum

En este trabajo se presentan los resultados de las pruebas biológicas realizadas para evaluar la funcionalidad y desempeño del suero fetal bovino de fabricación nacional sobre el crecimiento de cultivos celulares con diversos requerimientos nutricionales. Realizando ensayos de eficiencia de clonaje, eficiencia de plaqueo y curvas de crecimiento sobre líneas celulares y fibroblastos, se demostró que el suero de fabricación nacional puede ser empleado en el cultivo continuo de las líneas A549, PC-3, ht-29, MDA-MB231 con un buen desempeño; y en fibroblastos, las células LSPG8G, MDBK e hibridomas puede ser usado siempre y cuando se emplee al 10% y se realicen cambios de medio al menos cada 48 horas. En ninguno de los ensayos se observó un efecto tóxico o adverso sobre el crecimiento de las células empleadas, aunque en algunos casos se observó una menor funcionalidad frente al crecimiento celular comparando los resultados con otros sueros calificados. Los resultados obtenidos destacan la utilidad del SFB nacional en la aplicación para la propagación de células poco exigentes en ensayos de corta duración, así como en procedimientos transitorios tales como la inactivación de la actividad enzimática de la tripsina y criopreservación.

Introducción

El suero fetal bovino (SFB) es uno de los productos biológicos más empleados en el mantenimiento de cultivos celulares con aplicación en las áreas de inmunología, virología, ingeniería genética, farmacología y otras áreas de investigación biomédica. Este aporta factores de crecimiento, hormonas, minerales, lípidos y otros micronutrientes, que al ser usados en concentraciones apropiadas en el medio de cultivo, suplen satisfactoriamente los requerimientos metabólicos que garantizan la proliferación y adhesión celular (1-3).

En muchas de estas aplicaciones, la experimentación exige contar con un SFB altamente calificado, con control de calidad en todos sus procesos de obtención, comercialización, y que garanticen que el suero esté libre de agentes contaminantes que puedan representar riesgos para los diferentes tipos celulares a los cuales es aplicado de manera continua.

Aunque actualmente existen medios de cultivo libres de suero que permiten el crecimiento de algunos tipos celulares, éstos requieren ser suplementados con hormonas y otros factores que están involucrados en diferentes procesos celulares. Sin embargo, la adición de estos suplementos aumenta los costos del cultivo y hace poco rentable el cultivo a gran escala en condiciones libres de SFB.

Además, muchos de los agentes que se emplean  actualmente como suplemento en estos medios libres de suero son purificados a partir SFB, lo que impide su reemplazo definitivo (4).