Desarrollo y validación de una metodología por cromatografía líquida de alta eficiencia para la determinación simultánea de piperacilina sódica y tazobactam sódico en inyectables para uso humano

Validation of a high performance liquid chromatography method for the simultaneous determination of sodium piperacillin and sodium tazobactam in human injections.

Se presentan en este artículo los resultados obtenidos en el desarrollo y validación de una metodología analítica para la cuantificación simultánea de piperacilina sódica y tazobactam sódico en inyectables para uso humano. El procedimiento consiste en una separación por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC, por sus siglas en inglés) en fase inversa, empleando como fase móvil una mezcla de acetonitrilo e hidróxido de tetrabutilamonio 0,005 M de pH 5,0 (31:69), una columna C18 a 38 °C y detección a una longitud de onda de 220 nm. Se encontró que el método es selectivo, lineal y preciso. Estas características junto con su sencillez permiten que el método sea adecuado y conveniente para el objetivo propuesto. La robustez de la metodología también se investigó. El método validado se aplicó para la determinación de las dos sustancias en un producto inyectable del mercado colombiano, con registro sanitario del Instituto Nacional de Vigilancia y Control de Medicamentos y Alimentos (Invima).

Introducción

La piperacilina es un antibiótico betalactámico de amplio espectro, efectivo contra una gran variedad de microorganismos, incluyendo aquellos resistentes a la penicilina como el Streptococcus pneumoniae [1]. Es común encontrar este antibiótico asociado con inhibidores de la betalactamasa, tal como tazobactam, con lo cual se pretende aumentar la actividad de la piperacilina frente a microorganismos productores de la enzima. Zaghloul, Nyda y Yacobi [2] demostraron este efecto sinérgico, empleando una combinación de ocho partes de piperacilina por una parte de tazobactam.

Diferentes estudios se han realizado para comparar la actividad de algunas cefalosporinas y antibióticos betalactámicos, con la presentada por la asociación de piperacilina y tazobactam [1, 3-5]. Distintos métodos de análisis se encuentran en la literatura para la determinación de piperacilina y de tazobactam en muestras de variada naturaleza, así como para su determinación en mezclas. Peyrin, Guillaume y Guinchard determinan tazobactam, previa derivatización con 1,2,4-triazol [6] en suero y fluido hemofiltrado, alcanzando límites de detección del orden de 50 ng/mL. Por otra parte, Tang, Ma, Sun y Wang [7] realizan un estudio sobre las propiedades fluorescentes y su aplicación de los productos de descomposición de la piperacilina. Pajchel y Tisky

[8] determinan piperacilina en presencia de tazobactam mediante electroforesis capilar micelar, empleando dodecilsulfato de sodio como agente formador de micelas, y comparando los resultados obtenidos por cromatografía líquida. Marselos y Archontaki [9] determinan por cromatografía líquida piperacilina y tazobactam en un polvo inyectable, utilizando una columna C18 y una fase móvil de pH 5,0, compuesta por fosfato monosódico, acetonitrilo y metanol.