El modelo de ovario artificial como prueba celular para evaluar la seguridad de los extractos de Spirulina maxima y Kéfir: un estudio preliminar

The model of artificial ovary as a cellular test to evaluate the safety of Spirulina máxima and Kefir extracts: a preliminary study

S. maxima y Kefir son conocidos y utilizados por sus propiedades antioxidantes e inmunoestimulantes. El objetivo en este estudio fue evaluar los extractos naturales de estos dos agentes con la técnica de manipulación de ovocitos incluidos en folículos preantrales (MFP), porque la técnica puede reemplazar el uso de animales de laboratorio y también podría armonizar las leyes que intentan reducir y mejorar el uso de animales para el estudio de nuevos fármacos y para integrar a las buenas prácticas de laboratorio. Los extractos naturales estudiados fueron obtenidos a partir de S. maxima y Kéfir, las dos sustancias son conocidas en el mercado por su actividad antioxidante e inmuno estimulante. Los dos extractos fueron evaluados en suspensiones de 10, 50, 100 and 200 µg.$m{L}^{-1}$​. Los resultados muestran que Spirulinaprodujo disminución en la sobrevivencia, el desarrollo y el diámetro folicular. Mientras que Kéfir no mostró influencias positivas o negativas sobre el crecimiento y desarrollo de los folículos preantrales, sólo la concentración de 200 µg.$m{L}^{-1}$ disminuyóla sobrevivencia folicular. La técnica MFP demostró encajar en la política de las 3R (reemplazo, reducción y refinamiento) y permitió evaluar la citotoxicidad mostrando que la técnica puede ser usada como una prueba de seguridad en extractos naturales.

INTRODUCCIÓN

El desarrollo de nuevos productos es importante para la continua promoción de la salud humana y animal, sin embargo, es indispensable el estudio de metodologías alternativas que puedan evaluar la eficacia y la seguridad de estos productos. En este contexto, identificar y promover la implementación de métodos alternativos que puedan reducir, refinar y reemplazar (3R) el uso de animales de laboratorio en la investigación es urgente y desafiante [1]. Esta necesidad se hace más notoria con el continuo crecimiento de los productos naturales en el mercado, por ejemplo el uso de S. maxima y Kéfir como suplemento dietético [2-4]. Por otro lado en la biotecnología la manipulación de ovocitos, incluyendo los folículos preantrales, es usada para estudiar el fenómeno de la foliculogénesis y sus requerimientos metabólicos en cultivo in vitro [5-8] y con el propósito de tratar la infertilidad [9].

La técnica de estudio de manipulación de ovocitos incluidos en folículos preantrales (MFP) tiene diferentes ventajas además de los estudios fisiológicos [8, 10, 11], esta metodología puede usarse como un método alternativo que implementa la política de las 3R, que se refieren al uso de animales de laboratorio en investigaciones preliminares de varios fármacos y la evaluación de sustancias como los antioxidantes, las hormonas (FSH, LH, estradiol), los péptidos (péptido intestinal vasoactivo), y los factores de crecimiento (activin, GDF-9, KGF) [8, 12, 13].