PfGBP : una proteína de unión al telómero de Plasmodium falciparum

PfGBP : A Plasmodium falciparum telomere binding protein

Los telómeros son estructuras complejas de ADN y proteína localizadas en el extremo de los cromosomas eucariotes. Su principal función es proteger el extremo cromosomal de ser reconocido y procesado como ADNs fracturado, evitando así eventos de recombinación y fusión que conducen a inestabilidad cromosomal. El ADN telomérico consta de secuencias cortas, repetidas una tras otra, ricas en guanina; la cadena rica en guanina se extiende formando una región de cadena sencilla denominada extremo 3´ protuberante. Las proteínas por su parte, se pueden clasificar en: dsBPs, o proteínas de unión a la cadena doble, GBPs aquellas que reconocen específicamente el extremo protuberante y, proteínas que las interconectan mediante interacciones proteína-proteína. El gen PF3D7_1006800 de Plasmodium falciparum codifica para una proteína putativa similar a una GBP de Criptosporidium parvum, con el fin de establecer si esta proteína de P. falciparum presenta la capacidad de unión al ADN telomérico del parásito, se produjo una proteína recombinante a partir de la región codificante del gen, se purificó y se utilizó en ensayos de unión a ADN, y en la generación de anticuerpos policlonales específicos contra PfGBP. Nuestros resultados indican que la proteína de P. falciparum es una proteína nuclear con capacidad de unión al ADN telomérico in vitro, por lo que podría ser parte del complejo proteico encargado de proteger y/o mantener el telómero in vivo.

Introducción

El telómero es una estructura compleja de ADN y proteína presente en los extremos de los cromosomas lineales eucariotes, cuya función principal es mantener la estabilidad del cromosoma protegiéndolo de degradación, fusión y recombinación, permitiendo así la replicación completa del ADN (1). El ADN telomérico consta de secuencias cortas, ricas en guaninas (G) que se repiten una tras otra. En la mayoría de organismos la cadena rica en G se extiende hacia el extremo 3´ generando una región de ADN de cadena sencilla denominada extremo protuberante 3’ u overhang (2). En cuanto a las proteínas teloméricas, éstas se pueden clasificar en tres grupos: aquellas que se unen al ADN de cadena doble o dsBPs (double strand binding proteins), las que se unen al extremo protuberante o ssGBPs (single strand G rich binding proteins) y proteínas que las interconectan mediante interacciones proteína-proteína (3). Este complejo multiproteico cubre y protege el ADN de ser reconocido y procesado como ADN fracturado, por la maquinaria de reparación celular (4).

En células eucariotas, por cada división celular se presenta una pérdida de 50 a 200 bases de ADN telomérico, fenómeno conocido como el problema de la replicación final (5). En ausencia de mecanismos que compensen esta pérdida, se observa que luego de un número determinado de divisiones celulares los telómeros alcanzan una longitud crítica, lo cual interrumpe el crecimiento y lleva a un estado de senescencia y muerte celular (6).