Valoración de endotoxinas bacterianas en Ranitidina y Penicilina G sódica inyectable mediante la prueba de lisado del amebocito de limulus

Assessment of bacterial endotoxins in Ranitidine and injectable sodium penicillin G by the limulus amebocyte lysate test

Se realizó la estandarización y valoración de endotoxinas bacterianas por la técnica de Lisado del Amebocito de Limulus (LAL) para dos productos farmacéuticos: penicilina G sódica y ranitidina inyectable por el método de gelificación. Para ello se tomaron tres muestras de tres lotes diferentes; las muestras fueron escogidas al azar y se tomó una muestra del principio, una de la mitad y otra del final de la producción para cada lote muestreado. Con las muestras de cada lote se realizó un pool, quedando así tres sublotes para analizar, dándole mayor confiabilidad al método. Se comprobó la sensibilidad del reactivo de LAL (0.25 UE/ml) y se calificó al operario con el fin de obtener resultados confiables. Se consultó en la USP XXVI el límite de endotoxina para penicilina G sódica, 0.01 UE/100 UI y ranitidina 7 UE/mg. Se calculó la máxima dilución válida (MDV) que fue de 1:400 y 1:700 respectivamente; se practicaron los ensayos preliminares (Unspike y Spike) con los cuales se determinó la Dilución de trabajo para penicilina 1:100 y ranitidina 1:200. Con el ensayo final se valoró la presencia de endotoxinas bacterianas en los dos productos inyectables.

INTRODUCCIÓN

Hoy día, la calidad, inocuidad y seguridad de los productos farmacéuticos inyectables es de relevante importancia debido a su amplia formulación en la prevención y el tratamiento de muchas enfermedades. En la industria de medicamentos parenterales grandes volúmenes de agua libre de pirógenos son requeridos para la preparación de medicamentos inyectables. El ambiente de los laboratorios, el personal, los implementos y equipos de trabajo, así como el agua y materias primas, albergan microorganismos que se desarrollan y afectan la calidad de los medicamentos parenterales. Un contaminante propio de origen bacteriano en estos medicamentos son las denominadas endotoxinas, provenientes de las bacterias gram negativas. Estas endotoxinas producen consecuencias en el organismo y en algunos casos pueden causar la muerte convirtiéndose en un peligro para el hombre.​

Es por esto, que la industria farmacéutica requiere estandarizar técnicas rápidas y confiables, que permitan detectar la presencia de endotoxinas bacterianas, como lo es la prueba del Lisado de Amebocitos de Limulus (LAL). Es usado para detección de endotoxinas (derivadas del lipopolisacárido LPS de las bacterias gram negativas). Se basa en la aglutinación de extractos de amebocito de sangre de Limulus (cangrejo de mar) producido por cantidades del orden de picogramos de LPS. Puede detectar 300 células de E. coli. El método detecta células viables y no-viables. Es muy rápido y permite garantizar la calidad de productos que contribuyen al mejoramiento de la calidad humana.