Evaluación de la productividad de tres medios de cultivo para la recuperación de Helicobacter pylori

Evaluation of productivity of three culture means for recovery of Helicobacter pylori

La infección por Helicobacter pylori desde su descubrimiento por los médicos australianos Barry Marshall y Robin Warren en 1982, ha sido uno de los fenómenos científicos de mayor importancia en la literatura biomédica mundial, ya que juega un papel significativo en la etiología y patogénesis de diversas enfermedades gastrointestinales como gastritis crónica y ulcera péptica, además de ser un factor de riesgo importante para el desarrollo de cáncer gástrico. El método más específico de diagnóstico de este microorganismo es sin duda el cultivo. No obstante su sensibilidad varía notablemente en relación con diferentes variables: la colección, transporte, almacenamiento de la muestra; medios de cultivo utilizados y las condiciones de incubación. En este trabajo se evaluó la productividad de tres medios de cultivo para recuperar H. pylori, utilizando el método ecométrico. Los medios mostraron una baja productividad. Los valores de ICA fueron menores a 2,5, para cada uno de los medios de cultivo. La proporción de medios con ICA mediana y bajamente productivos fueron respectivamente los siguientes: Agar ATS: 7,6% y 92,3%, Agar BHI: 0% y 100%, Agar Brucella: 6,6% y 93,3%.

INTRODUCCIÓN

Helicobacter pylori (H. pylori), es un bacilo Gram negativo de forma espiral, mide de 2.5 a 5 micras, con 4 a 8 flagelos unipolares lo que lo hace altamente móvil. Desarrolla colonias pequeñas, grises, como gotas de rocío (Tummala et al., 2007). Su característica bioquímica más sobresaliente es la abundante producción de la enzima ureasa, que cataliza la hidrólisis de la urea en amonio y bióxido de carbono; la producción de amonio es un mecanismo importante para la supervivencia de la bacteria en un ambiente con pH tan ácido, como lo es el jugo gástrico (Rojas et al., 2004). La resistencia para sobrevivir a estas condiciones extremas es un requisito previo para la supervivencia de esta bacteria en el estómago (Hofman et al., 2004).

Para su desarrollo en medios de cultivo, H. pylori requiere de medios complejos ya sea sólidos o líquidos con suplementos como: sangre de caballo, hemoglobina, suero fetal bovino, carbón vegetal o emulsión de yema, además de nutrientes como peptona, triptona, extracto de levadura, glucosa, cloruro de sodio y bisulfito de sodio. Para una buena recuperación del microorganismo se adicionan antibióticos que minimizan la colonización de otras bacterias. Este microorganismo es de crecimiento lento, requiere de una temperatura de 35°C a 37°C en condiciones de microaerobiosis (5-10% de O₂, 5-10% de CO₂ y 80-90% de N₂), una humedad del 95%, un pH de 5,5 - 8,0 y un periodo de incubación de 3 a 10 días. (Bruce et al., 1997). Dentro de los medios de cultivos sólidos más utilizados se encuentran el Agar Mueller Hinton y el Agar Columbia, suplementados con sangre o sus derivados. Otros suplementos y nutrientes usados son el suero de caballo, lisado de eritrocitos, hemina, extracto de levadura, peptona e isovitalex.