Estandarización de condiciones para la prueba cuantitativa del NMP con bacterias nitrificantes y denitrificantes usando como matriz compost

Standardization of conditions for quantitative test MPN with nitrificant and denitrificant bacteria using compost as matrix

Con el fin de estandarizar metodologías que permitan determinar la concentración de bacterias nitrificantes y denitrificantes en compost, se propuso evaluar el crecimiento de estas bacterias en dos concentraciones diferentes del sustrato nitrogenado ((NH₄ )₂ SO₄ y KNO₃ ), en presencia y ausencia de CaCO₃ . Se utilizó la técnica de número más probable (NMP), revelando los tubos con reactivo de Griess (nitrito), reactivo de Nessler (amonio), y el polvo de zinc (nitrato). Se aplicaron 4 tratamientos para bacterias nitrificantes y denitrificantes respectivamente, trabajando a concentraciones de 0.5 o 0.33 g de (NH₄)₂ SO₄ y 0.5 o 2 g de KNO₃ , evaluados con respecto al mayor crecimiento de biomasa. No se encontraron diferencias significativas en la biomasa de los días 14, 15 y 16 para las bacterias nitrificantes, pero el día con mayor reporte fue el 15 con 115.88 NMP/g de compost, asimismo no se presentaron diferencias significativas que para las bacterias denitrificantes el día 15 y 16 arrojaron el mismo resultado con 31.42 NMP/g de compost. El tratamiento 1 hasta el día 15 (0.5 g de (NH₄)₂ SO₄ con 1 g de CaCO₃ en nitrificantes y 0.5 g de KNO₃ con 5 g de CaCO3 en denitrificantes) presentó mayor recuperación con recuentos de bacterias nitrificantes y denitrificantes con 112.67 NMP/g de compost y 27.53 NMP/g de compost respectivamente, al día 15. Se demostró que el sustrato nitrogenado, y la adición del carbonato de calcio son importantes para mantener del pH en el medio, promoviendo las reacciones enzimáticas asociadas.

INTRODUCCIÓN

El nitrógeno, uno de los macronutrientes de mayor importancia en los procesos biológicos, y está presente en diferentes formas en la naturaleza, aunque no todas son asimilables y puede perderse con gran facilidad del sistema (Fauci et al., 1999).

Las bacterias nitrificantes oxidan el NH₃ a formas más asimilables como NO₃ para las plantas, siendo grupos reconocidos oxidantes de amonio como Nitrosomonas sp., y oxidantes de nitrito, Nitrobacter sp. Las bacterias denitrificantes evitan las pérdidas de nitrógeno por escorrentía y lixiviación, al reducir formas oxidadas del nitrógeno reintegrándolo al ambiente. Algunas bacterias de este grupo incluyen varias especies de Pseudomonas, Alcaligenes y Bacillus (Myrold, 2005).

La técnica del número más probable (NMP) se utiliza para observar la densidad poblacional de un grupo determinado de microorganismos de forma indirecta. Girard y Rougieux desde 1964 describieron la metodología NMP para realizar recuento de bacterias nitrificantes y denitrificantes empleando suelo como matriz, con 0.5 g de (NH₄)₂ SO₄ como sustrato y adicionando CaCO₃ como estabilizador de pH.