Evaluación del tiempo y temperatura de incubación en el proceso detoxificación de una toxina tetánica

Evaluation of incubation time and temperature in the detoxification process of a tetanus toxin

Con el fin de disminuir el tiempo y la temperatura de incubación en el proceso de detoxificación de la Toxina Tetánica, se evaluaron diferentes tiempos y temperaturas de incubación; tomando cosechas en proceso del laboratorio de Producción de Tétanos del Instituto Nacional de Salud INS. Para determinar el día exacto de detoxificación se estableció un modelo logístico que involucró la estimación de la temperatura. La toxina se incubó a 4, 22 y 37°C, posteriormente se verificaron las características físico-químicas (pH), biológicas (Lf/mL, toxicidad inespecífica, específica y antigenicidad) del toxoide obtenido. Las mejores condiciones para el proceso son: 25 días de incubación a 37°C. Con las características citadas anteriormente se obtiene al año una ganancia de 1 ꞌ513.350 dosis, que representan en dinero un ahorro anual de $37833.750 en la producción de la vacuna tetánica.

INTRODUCCIÓN

Clostridium tétani, es el agente causal del tétanos, cuyo principal reservorio es el intestino de los seres humanos y animales, también se encuentra en la tierra en forma de esporas debido a la contaminación con heces fecales, en el polvo casero y en toda clase de productos contaminados. (Robinson J., 1975; Willet H., 1989).

El bacilo del tétanos tiene forma de un bastoncillo delgado, mide de 2 a 5µ de longitud y de 0.3 a 0.5µ de ancho, es Gram positivo, móvil, anoxigénico estricto, crece óptimamente entre 33 y 37ºC, produce esporas que se localizan en un extremo dando a la bacteria un aspecto característico de tambor. Puede ser cultivado en medios enriquecidos especialmente suplementados con sustancias reductoras,  a un pH neutro.

No es proteolítico y la actividad glucocidolítica depende específicamente de la cepa. (Me Clung, L.S. et al., 1971).

El Clostridium tétani, produce dos exotoxinas, la tetanolisina que no participa en la patogenicidad del tétanos y tetanoespasmina, neurotoxina extremadamente tóxica, responsable de todos los síntomas de la enfermedad; es sintetizada como una única cadena polipéptica de peso molecular 150Kda, que se libera en el medio de cultivo una vez comienza la autolisis celular y por acción de proteasas bacteriales se divide en dos cadenas una liviana de 50Kda y una pesada de lO0KDa. (Bizzini, Bernard. et al., 1969)

Las personas enfermas presentan total recuperación al ser vacunadas con toxoide tetánico, sólo o combinado (presentación doble con toxoide diftérico, TD o Td; o triple incluyendo el componente contra la tosferina, DPT. (Finn, Junior 1984; Furste, Wesley et al., 1974)